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将细胞系(或者原代细胞)在培养皿或培养板进行培养,根据细胞性质和需要不同,不同细胞所用的营养成分、气体环境、渗透压、促生长因子及激素、PH值等各不相同。
实验流程
1) 贴壁细胞
液氮冻存的细胞在37℃快速溶解→加入到预热的完全培养基种→离心去除冻存液→加入适量完全培养基重悬细胞→37℃培养至细胞汇合率80%→PBS清洗细胞板→加入适量胰蛋白酶覆盖细胞→37℃孵育数秒至数分钟→加入3倍含血清的完全培养基终止胰蛋白作用→200g~300g离心,去除胰蛋白酶→PBS重悬清洗细胞→用完全培养基重悬细胞→细胞计数→根据实验需要将一定的细胞量传代到新的培养瓶或培养板→放入37℃培养箱培养
2) 悬浮细胞
细胞复苏→37℃培养至细胞汇合率80%→细胞计数→根据实验需要吸出适量含悬浮细胞的培养液至新培养瓶或培养板→加入适量完全培养基→放入37℃培养箱培养