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免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)。在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受外来激发光的照射而发生明亮的荧光(黄绿色或橘红色),可以看见荧光所在的组织细胞,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
实验流程
培养贴壁细胞使其单层生长,悬浮细胞制备涂片→细胞洗涤、固定→通透(破膜)(细胞外表面表达的抗原不做此步)、洗涤→封闭→一抗结合、洗涤→二抗结合、洗涤→封片及检测
样品要求
新鲜细胞培养物;经固定的细胞样品。
样品信息
抗体名称、染色稀释比例、细胞处理方式等。
报告交付
实验所需试剂、仪器、实验方法、实验结果等。