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发布时间：2024-08-08 浏览次数：
油红染色的具体步骤
1.切片准备：使用固定液(如10%中性甲醛)固定组织切片，通常是冰冻切片，厚度约为10μm。
2.染色液配制：配制油红O饱和溶液，通常使用异丙醇作为溶剂。将油红O粉末溶解在异丙醇中，直到完全饱和。使用时，将油红O饱和液与蒸馏水按一定比例混合，过滤后使用。
3.染色：将切片放入染色液中，染色时间一般为8-10分钟，以确保脂滴充分染色。染色过程中应避免光线直射，以减少染料的挥发和沉淀。
4.分化：使用60%的乙醇或其他适当的溶剂轻轻分化切片，以去除未结合的染料。分化时间根据切片的具体情况进行控制，以达到清晰区分脂肪和背景的效果。
5.复染：使用苏木素或其他核染剂对切片进行复染，以突出细胞核的蓝色。复染后，使用蒸馏水清洗切片，以去除多余的染料。
6.返蓝：如果使用了酸性分化液，需要使用氨水或其他碱性溶液进行返蓝处理，恢复细胞核的蓝色。
7.封片：使用甘油或甘油明胶封片，以保护切片并便于显微镜观察。
8.显微镜观察：在光学显微镜下观察染色后的切片，记录和分析脂滴的分布和形态。
注意事项：
1.切片厚度：建议切片的厚度稍微厚一些，如8-10µm，以便更好地显示脂肪情况。
2.固定与否：冰冻切片在染色前是否需要进行固定，可以根据实验的具体需求和组织特性来决定。
3.对照设计：在实验设计中，建议设计阴性对照和阳性对照，以评估染色结果的准确性。
4.材料选择：石蜡切片由于包埋过程中需要脱水，可能会溶解中性脂肪，因此不适用于油红O染色。