新闻资讯

一、造模方法

常用的皮肤创伤愈合模型包括：

1. 全层皮肤切除模型：模拟全层皮肤缺损。

2. 部分厚度皮肤损伤模型：模拟浅表皮肤损伤。

3. 烧伤模型：模拟热力或化学烧伤。

4. 糖尿病皮肤溃疡模型：模拟糖尿病相关的慢性伤口。

以下以全层皮肤切除模型为例，介绍皮肤创伤愈合实验的步骤。

二、实验步骤

1. 实验动物

常用动物：C57BL/6小鼠或SD大鼠。

年龄：68周。

饲养条件：标准环境下适应性饲养1周。

2. 麻醉与备皮

麻醉：使用腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)或吸入异氟烷麻醉动物。

备皮：剃除背部毛发，用脱毛膏去除残留毛发，清洁皮肤。

3. 造模

全层皮肤切除：

1） 使用无菌手术剪刀或活检穿孔器在背部皮肤上制造直径68 mm的圆形全层皮肤缺损。

2）确保伤口深度达到皮下组织，但不损伤肌肉层。

3）止血后，伤口暴露或覆盖无菌敷料。

4. 术后护理

环境控制：保持动物饲养环境清洁，避免感染。

伤口观察：每日观察伤口愈合情况，记录伤口面积和炎症反应。

5. 药物处理(可选)

药物应用：根据实验需求，局部涂抹或注射药物(如生长因子、抗炎药)。

对照组：设置空白对照组和溶剂对照组。

三、检测指标

1. 伤口面积测量：

方法：使用数码相机拍摄伤口，图像分析软件测量伤口面积。

计算：伤口愈合率 = (初始伤口面积 当前伤口面积)/ 初始伤口面积 × 100%。

2. 组织病理学分析：

取样：在不同时间点(如第3、7、14天)取伤口组织。

染色：HE染色观察组织形态，Masson染色观察胶原沉积。

评估：炎症细胞浸润、新生上皮、肉芽组织形成和胶原排列。

3. 炎症因子检测：

方法：ELISA或qPCR检测TNFα、IL6、IL1β等炎症因子。

样本：伤口组织匀浆或血清。

4. 血管生成检测：

方法：免疫组化染色检测CD31或VEGF表达，评估新生血管形成。

5. 胶原含量检测：

方法：羟脯氨酸测定法或天狼星红染色法检测胶原含量。

四、注意事项

1. 动物选择：

选择健康动物，避免潜在疾病影响实验结果。

动物品系和年龄需一致，确保实验可比性。

2. 手术操作：

严格无菌操作，避免感染。

控制伤口大小和深度，确保一致性。

3. 术后护理：

保持动物饲养环境清洁，定期更换垫料。

观察动物状态，防止动物舔舐伤口。

4. 药物处理：

药物浓度和给药方式需预实验优化。

设置对照组，排除溶剂和操作对结果的影响。

5. 数据分析：

确保样本数量足够，每组至少6只动物。

使用统计学方法分析数据，确保结果可靠性。

五、总结

皮肤创伤愈合模型是研究皮肤再生和药物疗效的重要工具。通过全层皮肤切除模型可以模拟皮肤缺损和愈合过程，结合伤口面积测量、组织病理学分析和炎症因子检测，全面评估创伤愈合情况。实验过程中需注意动物选择、手术操作和术后护理，以确保实验结果的准确性和可重复性。