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血液样本根据处理方式不同，可分为全血、血清和血浆三类，具体收集与处理流程如下：

1. 全血样本

采集新鲜血液后，立即将其加入预先装有抗凝剂的离心管中。轻轻颠倒离心管数次，确保血液与抗凝剂充分混匀，达到完全抗凝的效果，即可获得全血样本。处理完成后，将全血样本置于冰上，等待后续检测。

2. 血清样本

采集新鲜血液后，将其置于室温环境下静置 30 分钟，待血液自然凝结形成血凝块。随后，以 2000×g 的离心力离心 10 分钟，离心结束后，上层呈现出的淡黄色澄清液体即为血清。小心吸取血清，置于冰上备用，等待后续检测。

3. 血浆样本

采集新鲜血液，加入含有抗凝剂的离心管中，颠倒离心管使血液与抗凝剂混匀，实现充分抗凝。接着，以 1000-2000×g 的离心力离心 10 分钟，离心后上层的淡黄色透明液体即为血浆。将血浆吸出后，放置在冰上，为后续检测做准备。

血液样本处理注意事项

(1)抗凝剂选择

需依据不同抗凝剂的性能特点，挑选适配的抗凝剂。实验室中常用的抗凝剂包括肝素类盐、乙二胺四乙酸(EDTA)以及枸橼酸钠。在生化实验中，通常建议选用肝素作为抗凝剂，以保障实验结果的准确性。

(2)样本保存

全血样本收集完毕后，若无法在当天完成检测，可在 4℃的环境下保存 1-2 天。

血清和血浆样本收集后，若暂时不进行测定，可分装后进行冻存，且务必避免反复冻融。一般情况下，在 4℃环境中可保存一周，-20℃环境下可保存半个月，-80℃环境下可保存一个月。但需注意，若检测指标为特殊指标，对样本保存条件有更高要求，则需遵循特殊指标的相关规定。

二、组织样本的收集与处理

组织样本主要通过制备匀浆的方式进行处理，根据组织来源不同，可分为动物组织匀浆和植物组织匀浆，具体操作如下：

1. 10% 动物组织匀浆

选取 0.02-0.2g 新鲜的动物组织块，使用 2-8℃的 0.01M、pH7.4 磷酸盐缓冲液(PBS)对组织块进行漂洗，以去除残留的血液。用滤纸将组织块表面的水分吸干后，对其进行称重，随后放入匀浆容器中。按照动物组织重量(g)与匀浆介质体积(mL)1:9 的比例，向匀浆容器中加入匀浆介质，在低温条件下进行匀浆处理。匀浆完成后，在 4℃环境下，以 10000×g 的离心力离心 10 分钟，离心结束后，吸取上层清液，置于冰上等待后续检测。

2. 10% 植物组织匀浆

取 0.02-0.5g 新鲜的植物组织块，用 2-8℃的生理盐水对其进行漂洗，之后用滤纸吸干表面水分并称重，再将其放入匀浆容器内。按照植物组织重量(g)与匀浆介质体积(mL)1:9 的比例加入匀浆介质，在低温环境下进行匀浆。匀浆操作完成后，于 4℃条件下，以 10000×g 的离心力离心 15 分钟，离心后取上层清液，放置在冰上，为后续检测做好准备。

组织样本处理注意事项

(1)匀浆介质选择

通常情况下，匀浆介质可选用 0.01M、pH7.4 的 PBS 或 0.9% 的生理盐水，具体可根据实验需求和组织类型进行调整。

(2)匀浆方式及操作

匀浆方式主要有手动匀浆和机械匀浆两种，具体操作如下：

手动匀浆：将含有匀浆介质的样本倒入玻璃匀浆管中，将匀浆管的下端插入盛有冰水混合物的容器中，以维持低温环境。将捣杆垂直插入匀浆管内，上下转动捣杆进行研磨，研磨次数需达到数十次，研磨时间控制在 6-8 分钟，确保组织充分匀浆化。

机械匀浆：将已称重的组织放入 EP 管中，加入适量的匀浆介质。使用组织匀浆机，在低温条件下，以 60Hz 的频率研磨 90 秒，制备成组织匀浆。对于皮肤、肌肉组织以及植物组织等难以匀浆的组织，可适当延长匀浆时间。

此外，组织匀浆制备完成后，需取少量组织匀浆制作涂片，在显微镜下观察细胞是否破碎。若细胞未破碎完全，可适当延长匀浆时间。在生化实验中，一般不推荐使用裂解液对组织进行裂解处理。

(3)样本保存

组织样本若暂时不进行测定，可进行低温冻存，但要避免反复冻融，以防样本成分被破坏。通常情况下，在 - 20℃环境中可保存半个月，-80℃环境下可保存一个月。若检测的是对样本要求较高的特殊指标，则需按照特殊指标的保存要求进行操作。同时，制备好的组织匀浆建议当天进行测定，不建议进行冻存。

三、细胞样本的收集与处理

细胞样本根据生长状态不同，可分为悬浮细胞和贴壁细胞，其收集与处理方法存在差异，具体如下：

1. 悬浮细胞

悬浮细胞可直接通过离心的方式收集细胞沉淀。具体操作步骤为：在 4℃环境下，以 1000×g 的离心力离心 10 分钟，离心结束后，弃去上层清液，保留底部的细胞沉淀。按照每 10⁶个细胞加入 300-500μL 匀浆介质的比例，向细胞沉淀中加入匀浆介质，然后进行机械匀浆处理，确保细胞充分破碎。判断细胞是否破碎完全，可通过观察是否存在明显的细胞沉淀，也可在显微镜下进行观察。细胞破碎后，在 4℃条件下，以 10000×g 的离心力离心 10 分钟，吸取上层清液，置于冰上等待后续检测。

2. 贴壁细胞

首先，用移液器吸弃细胞培养瓶中的培养液。使用 0.01M、pH7.4 的 PBS 对细胞进行清洗，去除残留的培养液。清洗完成后，收集细胞，贴壁细胞的收集方式主要有两种，分别是胰蛋白酶处理和细胞刮收集，在生化实验中，一般建议采用细胞刮收集贴壁细胞。收集细胞后，向培养瓶中加入 2-5mL 的 0.01M、pH7.4 的 PBS，轻轻吹打，使细胞分散，制成细胞悬液。后续的处理方法与悬浮细胞一致。

细胞样本处理注意事项

(1)匀浆介质选择

与组织样本类似，细胞样本匀浆常用的介质为 0.01M、pH7.4 的 PBS 或 0.9% 的生理盐水。

(2)匀浆方式及操作

细胞样本的匀浆方式包括手动匀浆、机械匀浆、超声破碎和反复冻融四种，具体操作如下：

手动匀浆：将含有匀浆介质的细胞样本倒入玻璃匀浆管中，将匀浆管下端插入冰水混合物中，保持低温。将捣杆垂直插入匀浆管，上下转动研磨数十次，研磨时间为 6-8 分钟，使细胞破碎。

机械匀浆：把含有匀浆介质的细胞样本装入 EP 管，使用机械匀浆机，在低温条件下，以 60Hz 的频率研磨 90 秒，促使细胞破碎。

超声破碎：可采用两种操作方式，一种是使用超声波发生器，以 14μm 的振幅超声处理 30 秒，使细胞破碎;另一种是使用超声细胞破碎仪，设置功率为 300W，每次超声 3-5 秒，间隙 30 秒，重复操作 4-5 次，实现细胞破碎。

反复冻融：先用 PBS 溶液或双蒸水将细胞重悬，然后对细胞悬液进行 “冷冻 - 融化 - 冷冻” 的循环处理，重复循环约 3 次。需要注意的是，这种方法可能会对某些酶的活力产生影响，因此在检测细胞样本中的酶活力时，不推荐使用反复冻融的方式破碎细胞。

细胞破碎完成后，需取出部分匀浆液制作涂片，在显微镜下观察细胞是否破碎完全。若细胞未破碎，可适当延长匀浆时间。在生化实验中，一般不推荐使用裂解液对细胞样本进行处理。

四、细胞培养基的收集与处理

细胞培养基样本的处理相对简便，直接吸取细胞培养后的上清液即可进行检测。若收集到的上清液存在浑浊现象，需在 4℃环境下，以 3000×g 的离心力离心 10 分钟，离心后吸取上层清液，置于冰上，等待后续检测。

五、体液样本的收集与处理

常见的体液样本包括唾液、尿液、胸水和乳汁，其收集与处理方法如下：

1. 唾液样本

首先，让受试者用清水漱口，漱口后等待 30 分钟，然后使用唾液采集器收集唾液样本。将收集到的唾液样本在 4℃环境下，以 10000×g 的离心力离心 15 分钟，离心结束后，吸取上层清液，置于冰上备用，等待后续检测。

2. 尿液样本

收集新鲜的尿液样本，将其放入离心管中，在 4℃条件下，以 10000×g 的离心力离心 15 分钟，离心后取上层清液，放置在冰上，为后续检测做准备。

3. 胸水样本

收集新鲜的胸水样本，将其加入预先装有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒试管，使胸水与抗凝剂充分混匀。之后，在 4℃环境下，以 10000×g 的离心力离心 10 分钟，离心完成后，吸取上层清液，置于冰上等待后续检测。

4. 乳汁样本

采集新鲜的乳汁样本，放入离心管内，在 4℃条件下，以 10000×g 的离心力离心 10 分钟。离心结束后，弃去上层的白色液体，吸取中层的清液，置于冰上，等待后续检测。

体液样本处理注意事项

体液样本收集完成后，若暂时不进行测定，可分装后进行冻存，且要避免反复冻融，防止样本成分发生改变。一般而言，在 4℃环境中可保存一周，-20℃环境下可保存半个月，-80℃环境下可保存一个月。若检测的是对样本要求较高的特殊指标，则需遵循特殊指标的相关保存规定。